生理学実験技術データベース
Experimental Techniques for Physiological Sciences
D-11
Last update: 2012-12-27
微量サンプルからのN-結合型糖鎖の精製・検出方法
Detection of N-Glycans on small amounts of glycoproteins in tissue samples
| 用途 | 生体内に含まれるN-結合型糖鎖を精製後蛍光標識し、HPLCで検出する。 |
|---|---|
| 特徴 | 約2fmolの感度で検出することが可能。 |
| 実験手順 |
１～６の手順で行う。 １． アセトン沈殿：糖タンパク質の濃縮、乾燥 ２． ヒドラジン分解：糖タンパク質からタンパク質と糖鎖を遊離させる。 ３． グラファイトカーボンカラム：不純物の除去、再アセチル化 ４． ピリジルアミノ化：ピリジルアミノ基による蛍光標識 ５． セルロースカラム：未反応のピリジルアミノ基の除去 ６． HPLCによる検出 |
| 使用上の制限 | 特になし |
| 参考資料 | Yoshimura et al., Anal Biochem., 15;423(2):253-60 2012 |