| 自然科学研究機構生理学研究所の村田和義准教授、ソン・チホン特任助教は、北里大学の片山和彦教授らの共同研究グループとともに、ノロウイルスが２通りの構造をもち、その構造を切り替えることによって細胞に感染できるようになることを発見しました。この研究成果は、ノロウイルスの感染メカニズムの解明に大きく貢献し、ノロウイルスに対する治療薬やワクチンの開発を大きく加速すると期待されます。本研究結果は、米国医学雑誌PLOS Pathogens（日本時間2020年7月3日午前3時解禁）にオンライン掲載されました。 |
ノロウイルスは世界中で流行しているウイルス性急性胃腸炎の主要な原因ウイルスで、現在でも発展途上国を中心に毎年約20万人がノロウイルス感染で命を落としています。日本国内においても、学校、飲食店、病院、養護ならびに介護施設などで度々集団感染を引き起こし、大きな社会問題となっています。しかし、ノロウイルスを培養できる細胞は非常に限られており、ウイルスそのものに関する構造学的な知見も少ないため、未だノロウイルス感染症への効率的な治療法はなく、ワクチンも存在しません。この様な状況の中、同研究グループは低温電子顕微鏡※1という装置を用いて、ノロウイルス粒子の構造を詳細に調べました。ノロウイルスの感染の仕組みの解明や治療薬およびワクチンの開発のためには、ウイルス粒子の構造情報がとても重要であるからです。
これまでノロウイルスは、その種類や系統によって粒子の表面構造に２種類のタイプが存在することが知られていました（図１）。内側の殻と外側の殻の間に隙間がないもの（Aタイプ）とあるもの（Bタイプ）です。例えば、ヒトのノロウイルスのGI.1株と呼ばれる粒子はBタイプを示しますが、GII.10株ではAタイプの殻の構造を示します。そして、マウスのノロウイルスのGV.1株は、以前の報告からBタイプとされてきました。ところが今回、我々が低温電子顕微鏡を用いてこのGV.1株の構造を調べたところ、なぜかAタイプの殻の構造を示しました。このことから「ノロウイルスは２つの構造を持ち、これを切り替えることができるのではないだろうか」と考えました。そこで同研究グループはさらに研究を進めて「どのようにしてこの２つの構造が切り替わるのか？」「ノロウイルスはなぜ２つの構造を必要とするのか？」について、その一端を明らかにしました。
ノロウイルスの低温電子顕微鏡による構造解析の結果、マウスのノロウイルスにおいて、同一種で異なる２つの粒子構造が存在することを発見しました（図２上）。そしてこの２つの構造は、溶液のpHとカルシウムなどの金属イオン※2の濃度を変えることによって切り替わることを見出しました。マウスノロウイルスは酸性条件下で金属イオンを加えるとAタイプを示し、アルカリ性条件にして、薬剤で金属イオンを取り除くとBタイプになりました。またこれらの構造の変化は、外側の殻を構成するタンパク質でできた突起が回転して縮み突起の上部で隣と結合するとAタイプに、逆方向に回転して伸び突起の下部で隣と結合するとBタイプになることもわかりました（図２中央）。
では、ノロウイルスはなぜこのような２つの構造をもっているのでしょうか？それぞれの構造タイプにしたノロウイルスを細胞に感染させたところ、Bタイプは、Aタイプに比べて４時間程度遅れて増殖することがわかりました（図２下）。また、別の実験からBタイプはAタイプに比べて細胞の表面に吸着しにくいこともわかりました。さらに、これら２つの構造はヒトのノロウイルス（GII.3株）の擬似粒子（ウイルス様中空粒子※3）においても確認することができました。これらの結果から、ノロウイルスはBタイプでは細胞に感染せず、Aタイプに変化してから感染すると考えられ、つまり、ノロウイルスは感染型（Aタイプ）と非感染型（Bタイプ）の２つの構造を切り替えていると考えられました。
本研究により、ノロウイルスは感染型（Aタイプ）と非感染型（Bタイプ）の２つの構造を持ち、BタイプからAタイプに構造を変化させて標的である小腸の細胞に感染することが示唆されました（図３）。では、なぜノロウイルスは２つの構造を必要とするのでしょうか？その答えはまだ明らかになっていませんが、一つは動物が持つ免疫システムを回避するためではないかと考えられます。
ヒトを含む動物は、ウイルスに感染しないようにするための独自の免疫システムを持っています。これは「ウイルスの構造を認識して、これに対する抗体を分泌しウイルスを封じ込める」というものです。ノロウイルスは動物の口から侵入し、消化されずに胃を通り越して、小腸の細胞に感染します。そこで通常はBタイプの構造でこの免疫システムを欺いて目的の小腸の細胞に近づき、最後にAタイプに変身して感染するのではないかと考えられます（図３）。
本研究は、国立研究開発法人日本医療研究開発機構（AMED）の新興・再興感染症に対する革新的医薬品等開発推進研究事業「下痢症ウイルスの病原性発現機構の解明及び新規治療薬・ワクチン等の開発に向けた研究」ならび創薬等ライフサイエンス研究支援基盤事業「創薬等先端技術支援基盤プラットフォーム（BINDS）」、日本学術振興会科学研究費、生理研共同研究の支援を受けて行われました。
※1 低温電子顕微鏡
試料を急速凍結し、氷の中に閉じ込めた状態で、電子顕微鏡で観察する方法。生きた状態に近い試料の様子が観察できる。
※2 金属イオン
金属原子が電子を放出した状態。金属は金属イオンの状態で水に溶けることができる。
※3 ウイルス様中空粒子
ウイルスタンパク質からウイルス粒子を試験管の中で作製したもの。ウイルスと同じ形を持つが、遺伝子を含まないため感染性がなく、ワクチンなどとして用いられる。一般にはVLP（Virus Like Particles）と呼ばれる。
（上）左：低温電子顕微鏡による構造解析で得られた粒子の全体像、右：中心のスライス像。（中央）粒子表面の拡大像。Aタイプは、粒子外側を構成するタンパク質の突起が回転して縮み上部で隣と結合することで形成され、Bタイプは、逆に回転して伸び下部で隣と結合して形成される。（下）２つの構造におけるウイルスの増殖速度の差を示すグラフ。
今回の研究により、マウスのノロウイルスの構造変化と感染のメカニズムの一端を明らかにすることができました。ヒトのノロウイルスでは、２つの構造を同じ株（GII.3株）の中で初めて確認することができましたが、まだどのように２つの構造が切り替わるかはわかっていません。しかし、ヒトのノロウイルスでも同様のメカニズムが用いられていると想像されます。今後さらに研究を進めることで、ヒトのノロウイルスについてもその構造変化と感染メカニズムが明らかになり、治療薬やワクチンの開発へとつなげて行けると期待されます。
Dynamic rotation of the protruding domain enhances the infectivity of norovirus
Chihong Song, Reiko Takai-Todaka, Motohiro Miki, Kei Haga, Akira Fujimoto, Ryoka Ishiyama, Kazuki Oikawa, Masaru Yokoyama, Naoyuki Miyazaki, Kenji Iwasaki, Kosuke Murakami, Kazuhiko Katayama, Kazuyoshi Murata
PLOS Pathogens. 2020年 7月2日午後2時（米国東部標準時）
https://journals.plos.org/plospathogens/article?id=10.1371/journal.ppat.1008619
＜研究について＞
自然科学研究機構 生理学研究所 脳機能計測・支援センター形態情報解析室
准教授 村田 和義（ムラタ カズヨシ）
北里大学大村智記念研究所・北里大学大学院感染制御科学府ウイルス感染制御学I研究室
教授 片山 和彦（カタヤマ カズヒコ）
＜広報に関すること＞
自然科学研究機構 生理学研究所 研究力強化戦略室（広報）
学校法人北里研究所 総務部広報課
＜AMED事業に関すること＞
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構（AMED）創薬事業部 創薬企画・評価課
自然科学研究機構 生理学研究所
学校法人 北里研究所
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構
